为什么大家都用荧光蛋白定位标记？用什么光源激发GFP荧光蛋白?

为什么大家都用荧光蛋白标记？用什么光源激发荧光蛋白?

1 易于检测，灵敏度高。

GFP荧光反应不需要外加底物和辅助因子，只需紫外光或蓝光激发，即可发出绿色荧光，用荧光显微镜甚至肉眼就可以观察到。其次，即便是未经纯化的

GFP发射的绿光也是相当强的，在正常室内光线下仍清晰可辨。对于单细胞水平的表达也可识别。

2. 荧光性质稳定。

GFP对光漂白（一种荧光衰减现象）有较强的耐受性，能耐受长时间的光照，从而延长了可探测时间；GFP在pH7~ 12范围内也能正常发光，

对高温（70 ℃）、碱性、除垢剂、盐、有机溶剂和大多数普通酶都有较强抗性。

3 对细胞无毒害。

从目前的研究结果来看，GFP对生活的细胞基本无毒害，与目的基因融合后，对目的基因的结构功能没有影响，转化后细胞仍可连续传代。

4. 构建载体方便。

由于编码GFP的基因序列很短，所以很方便地同其它序列一起构建多种质粒，而不至于使质粒过大影响转化频率。

5  可直接用于活细胞测定。

GFP 是能在异源细胞内表达后，能自发产生荧光的蛋白，并且GFP的分子量较小，N-端和C-端都能忍受蛋白的融合，是理想的标记物，可进行活细胞实时定位观察，更能接近自然真实的状态。如在活细胞中直接观察蛋白向细胞核、内质网运动的状态，还可实时观察到

外界信号刺激下，目的蛋白的变化过程，借助荧光显微镜观察，使研究更为方便。使用激光共聚焦显微镜，其图像效果更佳，结合现代的计算机软件，可进行三维显示。

6 不受假阳性干扰。

由于其他生物本身不含有GFP，因此不会出现假阳性结果，GFP作为分子探针可以代替荧光染料，避免由于染料扩散造成的定位不准，使结果真实可靠。

7 广谱性。

表现在GFP的表达几乎不受种属范围的限制，在微生物、植物、动物中都获得了成功的表达，其次是GFP没有细胞种类和位置上的限制，在各个部位都可以表达发出荧光。

8 易于得到突变体。

如GFP中氨基酸的替换可产生不同光谱特性的突变体，且增强了荧光强度，适合在不同物种中专性表达。

用什么光源激发荧光蛋白?

美国路阳LUYOR-3415荧光蛋白定位激发光源 

LUYOR-3415荧光蛋白定位激发光源可与荧光蛋白观察镜luv-50或 luv-60一起使用直接观察绿色荧光蛋白（GFP）或黄色荧光蛋白（YFP）。激发光源与观察眼镜LUV-50共同使用，可在动物设备的固定位置如消毒层流柜直接观察绿色荧光蛋白（GFP）。两个握杆之间的空间可容纳小动物的笼子（如小鼠）。LUYOR-3415激发光源使用110/220v，可与观察镜luv-50 或 luv-60一起使用直接观察绿色荧光蛋白（GFP）或黄色荧光蛋白（YFP）。

路阳GFP激发光源的典型用户：

1.中国农业大学

2.北京农业大学

3.南京农业大学

4.中山大学

5.中国农业科学院果树研究所

6.中国农业科学院水稻研究所

7.西北农林大学

8.华中农业大学

9.福建农林大学

10.山东农业大学。。。。。。

 LUYOR-3260便携式激发光源的介绍：

http://www.luyor.net/product/product166.html